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一分鐘學(xué)會Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)的測試方法、實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):2984 更新時間:2022-04-11

Morris水迷宮是英國心理學(xué)家Morris于20世紀(jì)80年(1981)代初設(shè)計(jì)并應(yīng)用于腦學(xué)習(xí)記憶機(jī)制研究的一種實(shí)驗(yàn)手段,其在阿爾茨海默病(AD)研究中的應(yīng)用非常普 遍。較為經(jīng)典的Morris水迷宮,測試程序主要包括定位航行試驗(yàn)和空間探索試驗(yàn)兩個找隱藏在水中平臺的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測試實(shí)驗(yàn)動物對空間位 置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。




實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動物(小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測試實(shí)驗(yàn)動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記 憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老等多個學(xué)科的科學(xué) 研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其 是學(xué)習(xí)與記憶研究的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)原理

雖然老鼠是天生的游泳健將,但是它們卻厭惡處于水中的狀態(tài),同時游泳對于老鼠來說是十分消耗體力的活動,它們會本能 的尋找水中的休息場所。尋找休息場所的行為涉及一個復(fù)雜的記憶過程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺信息,再對這些信息進(jìn) 行處理、整理、記憶、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隱藏在水中的站臺,最終從水中逃脫。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備

小鼠Morris 水迷宮在線檢測系統(tǒng)由一個ABS噴塑圓柱形水池和VisuTrack動物行為分析系統(tǒng)(上海欣軟)兩部分組成。水池直徑為120cm,高50cm。平臺直徑6cm,高14cm。按東南西北四個方向?qū)⑺仄?均劃分為4個象限(NE、SE、SW、NW),象限池壁圓弧中點(diǎn)為可選的動物入水點(diǎn),平臺可置于任意一個象限的中央。VisuTrack圖像采集分析系統(tǒng)記錄動物游泳軌跡數(shù)據(jù),用于指標(biāo)的提取及分析。攝像頭可以使用模擬相機(jī),清晰度在700線以上為好,2.8mm廣角鏡頭。

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Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)方法

  • 定位航行實(shí)驗(yàn)(place navigation)

實(shí)驗(yàn)開始先將小鼠放入水池中(不放平臺)自由游泳2min使其熟悉迷宮環(huán)境。實(shí)驗(yàn)共歷時5d,每天定于固定時間段,每個時間段訓(xùn)練4次。訓(xùn)練開始時, 將平臺置于 NW 象限,從池壁四個起始點(diǎn)的任一點(diǎn)將小鼠面向池 壁放入水池。自由錄像記錄系統(tǒng)記錄小鼠找到平臺的時間(逃避 潛伏期)和游泳路徑,4次訓(xùn)練即將小鼠分別從四個不同的起始點(diǎn) (不同象限)放入水中。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)方法小鼠找到平臺后或120s 內(nèi)找不到平臺(潛伏期記為 120s),則由實(shí)驗(yàn)者將其拿上平 臺,在平臺上休息15s再進(jìn)行下一次試驗(yàn)。每天以小鼠4次訓(xùn)練 潛伏期的平均值作為小鼠當(dāng)日的學(xué)習(xí)成績。

  • 空間探索試驗(yàn)(spatial probe)

第6天撤除原平臺,將小鼠任選 1 個入水點(diǎn)放入水中,所有小鼠必須為同一入水點(diǎn),記錄大鼠在2min 內(nèi)跨越原平臺的次數(shù)。



注意事項(xiàng)

在實(shí)驗(yàn)過程中注意事項(xiàng)尤為重要,只有注意這些外部因素才能使實(shí)驗(yàn)不受影響順利進(jìn)行,而且實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。

1、對比食物驅(qū)動的模型,水迷宮實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)在于,動物具有更大的、逃離水環(huán)境的動機(jī)。而且不必禁食,特別適合老年動物的測試。加上它對衰老引起的記憶減弱尤其敏感,因此,水迷宮常用于老年動物記憶的研究。

2、每天在固定時間測試。操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。懸尾應(yīng)激可顯著損傷小鼠的空間記憶及其反轉(zhuǎn)學(xué)習(xí)的獲得和鞏固,其中相對空間記憶及其反轉(zhuǎn)學(xué)習(xí)的鞏固受損尤為嚴(yán)重,所以在實(shí)驗(yàn)過程中避免小鼠懸尾時間過長。

3、當(dāng)與其他同類實(shí)驗(yàn)相比較時,要注意到動物的性別、品系、泳池的尺寸和水溫等多種因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。此外,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時,要考慮到動物的體質(zhì)量、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對游泳速度可能造成影響。

4、用老年動物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,應(yīng)確認(rèn)動物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作。其方法如下:將平臺露出水面使動物能夠看見平臺。動物放入泳池后如毫無困難地直接游向平臺,說明動物的游泳能力和視力均正常,可以開始實(shí)驗(yàn)。

5、 游泳對動物是一個較大的應(yīng)激刺激,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化。這些變化可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。對老年動物,嚴(yán)重時可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致卒中甚至死亡。因此,必要時可將動物多次放入泳池或適當(dāng)延長其游泳時間以增加動物對游泳的適應(yīng)能力。

6、水迷宮實(shí)驗(yàn)過程中,水面布光和對外界環(huán)境的隔離要求很高,水面的陰影會干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,外界工作人員或者其他物體移動會干擾實(shí)驗(yàn)動物的記憶,所以水迷宮外的一切物品在實(shí)驗(yàn)的始終要保持不變。

參考文獻(xiàn)

[1] 薛丹,徐淑萍,劉進(jìn)修,等. 水迷宮實(shí)驗(yàn)中三種品系小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的比較[J]. 中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào),2010 ,18(2):149-152.

[2] 朱丹彤,肖波,謝光潔,等. 化學(xué)點(diǎn)燃癲癇大鼠在水迷宮中學(xué)習(xí)記憶能力的測定[J]. 卒中與神經(jīng)疾病,2003,10 (1):36-39.

[3] 馮力民,吳真,佟也芒. 用水迷宮建立大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶模型[J]. 北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2007,8(1):46-49.



Morris水迷宮是利用小鼠尋找水中的休息場所的本能,通過定位航行試驗(yàn)和空間探索試驗(yàn)兩個部分來測 試小鼠對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。在實(shí)驗(yàn)過程中注意事項(xiàng)不容忽視,只有注意這些外部因素, 才能使實(shí)驗(yàn)不受影響順利進(jìn)行,而且實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。